Northern Blot – Biología molecular – Genética

O Northern blot es una técnica utilizada en la investigación en el campo de la biología molecular para estudiar la expresión génica, es decir, investigar si un gen determinado en un genoma se transcribe o no en ARN y cuantificarlo. El nombre de esta técnica deriva de la similitud entre ésta y el procedimiento Southern Blot, nombrado por el biólogo británico Edwin Southern, con una distinción en la clave, que en lugar de ser ADN, el material genético buscado es ARN.

Una diferencia entre ambas técnicas es la adición de formaldehído al gel de agarosa (funciona como desnaturalizante) en la técnica en cuestión. Al igual que con el Southern Blot, la sonda de hibridación se puede preparar a partir de ADN o ARN.

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Anteriormente, a veces se utilizaba la técnica Northern Blot inversa. En este tipo de procedimiento, el ácido nucleico, que estaba incrustado en la membrana, era una colección de fragmentos de ADN aislados y la sonda, a su vez, era un ARN tomado de un tejido y marcado radiactivamente.

El uso de los llamados microarrays (microarrays) de ADN, diseminado a fines de la década de 1990 y principios de 2000, utiliza la técnica más cercana al procedimiento inverso, que implica el uso de fragmentos de ADN aislados fijados a un sustrato y la hibridación con una sonda preparada con ARN. Así, la técnica inversa, aunque no de uso común, permitió el estudio simultáneo de la expresión génica de diferentes genes, mediante el uso de análisis Northern mejorado para establecer el perfil de expresión, en el que prácticamente todos los genes de un organismo pueden tener sus expresiones monitorizadas. .

Fuentes:
http://pt.wikipedia.org/wiki/Northern_blot
http://www.fcfar.unesp.br/laboratorio_sandro_valentini/pdf/A45-%20NORTHERN%20BLOT.pdf

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